抗体定制

单克隆抗体是由激活的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合而成的单克隆杂交瘤细胞产生的。小鼠单克隆抗体是最常见最经典的单克隆抗体。小鼠单抗具有“高度特异性、高度均一性、可快速、大量、连续生产、应用领域广泛，涵盖检测治疗等多个领域、制备方案和工具成熟、应用前景良好“特点，同时小鼠也是生物学和医学领域中最常见的模式动物之一

本服务项目主要是根据客户的要求免疫Balb/c小鼠，提取B细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合，制备特异性的鼠单克隆抗体。

一、服务内容

• 客户可提供抗原制备鼠源单克隆抗体，抗原可包含：天然蛋白、重组蛋白、细胞或细胞提取液、病毒或病原体、菌种或菌体蛋白、小分子多肽、化合物；其中小分子多肽和化合物等半抗原免疫前需偶联载体蛋白。
• 客户可提供蛋白名称、GeneID、核酸序列、氨基酸序列等信息，我公司根据客户的实验需求设计抗原、合成多肽抗原或表达蛋白抗原，免疫动物制备单克隆抗体。
• 可提供抗体标记、抗体对筛选、试剂盒开发、免疫学检测等增值服务。

二、 抗原要求

• 客户提供制备抗体所需蛋白或多肽片段，蛋白抗原：蛋白总量>10mg、浓度＞1mg/ml、纯度>85%，分子量>10KDa。多肽抗原：多肽重量>10mg、纯度>95%抗原纯度。
• 客户提供的抗原信息应包含蛋白抗原的英文全称、种属信息、GeneID或序列信息；化合物抗原应提供化学结构式、活性基团、溶解性等信息。
• 请提前说明样品来源和生物危害等情况，或其他任何特殊情况。

三、制备流程

1.动物免疫

1. 免疫5只小鼠，进行2-3次免疫；

2.  采集5只小鼠血清，分别做ELISA检测；

3.  提供鉴定报告。

4.  周期4-6周

2.杂交瘤制备

效价合格后，经客户同意后，进行融合实验：

1. 选取血清效价最高的小鼠的取脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合。

2．有限稀释融合细胞，96孔板克隆化；

3. HAT筛选杂交瘤细胞;

4. 免疫原检测，检测出抗原阳性1-10个阳性细胞，扩大培养至48孔板；

5. 挑取阳性克隆扩增，微量-80度冻存细胞【冻存细胞可保存1年以上】；

6. 提供客户1ml上清/阳性克隆，供客户检测,检测结果20天内反馈。

客户根据自己的ELISA检测、功能检测结果，挑选阳性克隆；丢弃其余克隆。如果客户需要保存其余克隆，需要提前沟通，另行约定费用和保存方式。

7.货期4-6周。

3.亚克隆

根据客户的要求，选取阳性克隆进行亚克隆：

1. 每个克隆做96孔板有限稀释培养，ELISA筛选阳性亚克隆；

2. 阳性克隆扩增，少量-80度冻存细胞；

3. 提供1ml杂交瘤细胞上清，供客户进行检测；检测结果请在20天内反馈。

4. 周期1-3周

套餐中包括总共不超过3个阳性亚克隆细胞，默认根据结果最佳的3个阳性亚克

隆，放大至T-25 Flask培养，ELISA再次确认后进行细胞冻存，每个亚克隆冻存3

管细胞。

4.腹水制备(可选)

1. 客户选取的杂交瘤细胞制备腹水，免疫2只小鼠，Protein A纯化腹水，ELISA检测效价；

2. 提供纯化后杂交瘤细胞，<5mg/clone；

3. 提供实验报告和剩余腹水抗体；

4.周期1-3周

注：亦可选择细胞上清纯化。

5.套餐外阳性杂交瘤细胞的选取(可选)

套餐(3个亚克隆)之外的其它备选细胞,若客户需要亚克隆,每额外增加一个亚隆,需

要额外支付的费用。

6.抗体配对（可选）

1.若干株阳性单抗两两组合，进行夹心ELISA实验；

2.根据夹心ELISA实验结果挑选配对抗体；

3.出具相关的检测报告提供给客户。

4.周期4-6周

7.功能验证（可选）

可以根据客户对抗体的要求进行ELISA、WB等实验的检验验证，确定制备获得的抗体是否可用于该实验。周期1-3周

8.保证型服务（可选）

重复前述实验（杂交瘤制备，抗体纯化和检测实验。如有必要则重复动物免疫实验）直至获得符合要求的抗血清或纯化抗体。

四、收费标准

五、您将收获：

完整详实的实验报告和鉴定/验证报告

阳性杂交瘤上清（用于客户鉴定和挑选）

3株阳性细胞株亚克隆（或选择直接阳性克隆扩大培养）

纯化的高特异性与高亲和性的小鼠源单克隆抗体